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幽门螺旋杆菌单链抗体的筛选及判决

来源:未知 作者:admin 人气: 发布时间:2019-10-21
摘要:幽门螺旋杆菌单链抗体的筛选及判断_生物学_自然科学_专业材料。为了得到幽门螺旋杆菌特异性单链抗体scFv,通过噬菌体闪现身手,初度直接用幽门螺旋杆菌细胞Hp对噬菌体单链抗体文库Tomlinson实行单链抗体的筛选,经5轮筛选后,通过ELISA技巧检测,从随机挑选的96个

  幽门螺旋杆菌单链抗体的筛选及判断_生物学_自然科学_专业材料。为了得到幽门螺旋杆菌特异性单链抗体scFv,通过噬菌体闪现身手,初度直接用幽门螺旋杆菌细胞Hp对噬菌体单链抗体文库Tomlinson实行单链抗体的筛选,经5轮筛选后,通过ELISA技巧检测,从随机挑选的96个克隆中得到了8株阳性克隆。再区别将阳性克隆与10种常睹菌实行ELISA的交叉反映,最终取得1株特异性外达抗Hp的scFv的噬菌体JH1。随后又进一步对JH1所外达的scFv基因实行PCR扩增,分。

  第 6卷第 5期 20 0 8年 9月 生 物 加 工 过 程 Sp 0 8 e .2 0 - C ie eJ u n lo o rc s n i e r g hn s o r afBipo esE gn ei n 5? 5 幽 门螺 旋 杆 菌 单链 抗体 的 筛选 及 鉴 定 纪 卿 丁虎 生 杨 炼 王铁 斌 张 灏 , 卫 一, , , 一, 陈 ( .江 南大 学 食 品学院 , 1 无锡 24 2 ; .江南 大学 生 物工程 学 院 , 112 2 无锡 24 2 ) 112 摘 要 : 了得到 幽门螺旋杆 菌特异性单链抗体 sF , 为 c v通过噬 菌体展 示技 术 , 初度直接 用幽 门螺 旋杆 菌细胞 H p对 噬 菌体 单链抗体 文库 T ml sn实行单链抗体 的筛选, 5轮 筛选后 , o io n 经 通过 E IA技巧检 测 , 随机挑选 的 9 LS 从 6个克 隆中得到 了8株 阳性 克隆。再 区别将阳性克隆与 1 常睹 菌进 行 E IA的 交叉反 应 , 0种 LS 最终取得 1株特 异性外达 抗 Hp的 sF c v的噬菌体 J 。随后 又进一 步对 J 1所外达 的 sF H1 H e v基 因实行 P R扩增 , C 区别取得 sF c v的 V H片断 、 V L片断 , 长 基 因分 别 为 57b 、6p和 9 5b , 些 蕴涵 着部 分 载 体 序 列 的 D A 片断 与 理 论 值 相 符 。 通 过 对 全 2 p3 8b 3 p 这 N sF cv全长基 因实行测序 , N B 正在 C I中实行基 因序列 比对 , 已报 道 的一种植物 R A病毒 的复制酶 单链抗 体基 因序 与 N 列 有 9 % 同源 性 。 6 合头 词 : 门螺 旋 杆 菌 ; 菌 体 展 示 ; F ; 胞 筛选 ; LS 幽 噬 s v细 e E IA 中 图分 类 号 : 7 Q8 文献符号码 : A 文 章 编 号 :6 2— 6 8 20 )5— 05— 5 17 3 7 (0 8 0 0 5 0 S r e n n d ntfc to o i l ha n a tbo y c e ni g a d i e i a i n fsng e c i n i d i f a m e g i s ei o a trp o i r g nta a n tH l b ce ylr c J Q n D N us e g , A G La WA G Tebn 一, H N a C E i I ig 一, I G H —h n Y N in , N i—i Z A G H o 一, H N We ( . col f odS i cn ehooy J nnnU ie i , x 2 4 2 , h a 1 Sho o F oc nea dT cnlg , i ga n r t Wui 1 12 C i ; e a v sy n 2 col f it h o g , i g a nvri , x 2 4 2 ,C ia .S ho o Bo cn l y J nn nU ie t Wui 1 12 hn ) e o a sy Abta tA p aedsl ei l—hiai l f g e tssl t sF )t seicl idH l src : h g —i a ds gec a vr be r m n i e c d(c v o pcf a ybn e— py n n a a e e i l l cbc r yoi( p .T eit t p cl e a n daa s t u n sF ba e T ml sn . oat l e p r H ) h a e sw r p n egi t h h mac vl rr s( o i o ) ncH l e ne i i n Eih o iie co e r b ane r m 6 r n o co e fe v o d s r e i g a g tp stv l n s we e o t i d fo 9 a d m l n sa tr f e r un c e n n nd ELI A s a . i S a s y F n l ,o l igeco eJ 1,whc x rsec vs e i c l idn o Hp,w ss lce o o ial y nya sn l ln H ih e pe ss sF p cf al bn igt i y a ee td frn cosra t nw t i ee tb cei.P R o . n c vg n rmH s o d ta es eo r se ci i 1 df rn a tra C f o h 0 f VH VL a d sF e efo J 1 h we h tt i f h z VH , nd s Fv g ne we e 5 7 b VL a c e r 2 p,3 8 p a d 9 5 b 6 b n 3 p,r s e tv l S q ncn r s Fv a d t e e p ciey. e ue i g f c n h n o BLAS i Tn NCBIi ia e h e s9 nd c td t e g ne。

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